NGS工作流程可以分为这三步
更新时间：2021-11-18 点击次数：3494
NGS工作流程通常从样品制备步骤开始，其成功与否对确保可靠的测序结果至关重要。为了获得足够数量和质量的核酸，需要对样品进行有效和均匀的研磨。机械裂解，更具体地说是珠磨式技术，被认为是样品研磨均匀化的黄金标准。
NGS工作流程可以分为这三步：
文库制备：为了节省资源，可以将多个文库混合在一起，在同一运行中进行测序——该过程称为多重分析。接头连接过程中，标签序列（或说“条形码”）会添加到每个文库。这些条形码可以在数据分析过程中区分文库。这步是为获取足够量的/目的的/前期适合上机测序而标准处理DNA。其程序主要有：片段化，连接，扩增。
测序：在边合成边测序（SBS）过程中，化学修饰的核苷酸会通过天然的互补性与DNA模板链结合。每个核苷酸都有一个荧光标记和一个可逆终止子，后者可以阻止下一个碱基的掺入。荧光信号可以指示出加入的核苷酸种类，终止子被切割后，下一个碱基才可以继续结合。其实就是把把采集到的样品分离提纯成需要的基因组DNA，再把这些DNA打成小片段，然后再在这些DNA小片段两头接上识别标记和测序接头，最后再通过基因捕获技术筛选出目的DNA，根据需求PCR扩增。然后，就可以上机测序了。上机测序的过程就是读取这些。
数据分析：可以使用直观的数据分析应用程序来分析NGS数据，无需进行生物信息学培训或另外雇佣实验室人员。这些工具可以进行序列比对、变异检出、数据可视化或解读。
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